FUNDAMENTO
El Waaler Rose es una técnica de hemaglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de FR en suero humano. Los hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo antihematíe de oveja, son aglutinados por FR presentes en la muestra del paciente.
OBJETIVO
Averiguar la concentración aproximada de FR por hemaglutinación.
UTILIDAD CLÍNICA
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, tales como el lupus eritematoso sistémico (SLE) y el síndrome de Sjögren, su principal interés clínico radica en el diagnóstico de la artritis reumatoide (RA). Un estudio actual realizado por el “American College of Rheumatolgy” demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron positivos para el FR.
MUESTRA
Suero fresco. Estable 8 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC.
REACTIVOS
Waaler Rose -> Suspensión hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti-hematíe de oveja, pH, 8,2.
Control + (Tapón rojo) -> Suero humano con una concentración de FR > 30 UI/mL.
Control - (Tapón azul) -> Suero animal.
MATERIAL NECESARIO
Pipetas de 50 µL con sus correspondientes puntas.
Porta.
PROCEDIMIENTO
Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.
Método cualitativo:
Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.
Depositar 50 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
Mezclar el reactivo de WR vigorosamente. Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores.
Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
Situar el porta sobre una superficie lisa y plana durante 2 minutos.
Inmediatamente después, inclinar el porta unos 45º de la horizontal y dejarlo nuevamente en reposo durante 1 minuto. El exceso de tiempo puede originar la aparición de falsos positivos.
Método semicuantitativo: (en este caso no se realiza este método, ya que la muestra ha resultado negativa)
Realizar diluciones dobles de la muestra en SSF 9 g/L.
Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.
CÁLCULOS
La concentración aproximada de FR en la muestra del paciente se obtiene mediante la siguiente fórmula:
8* título FR= 8*8 = 64 UI/ml
RESULTADOS
Los valores de referencia según este laboratorio se encunetra hasta 8 UI/ml.
En este caso podemos observar la aglutinación es - por tanto no se procede a la realización del método semcuantitativo.
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