PRÁCTICA Nº4: ASO-LÁTEX

FUNDAMENTO

El ASO-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de anti-estreptolisina O (ASO) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con estreptolisina O (SLO) son aglutinadas por anticuerpos ASO presentes en la muestra del paciente.

OBJETIVO

Determinar una concentración aproximada de estreptolisisna O en el suero humano.

UTILIDAD CLÍNICA

La estreptolisina O es un exoenzima inmunogénico tóxico producido por estreptococos -hemolíticos de los grupos A, C y G. La cuantificación de los anticuerpos ASO se utiliza para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como las fiebres reumáticas, glomerulonefritis aguda, y otras infecciones estreptocócicas, como son las fiebres reumáticas, que es una enfermedad inflamatoria que afecta al tejido conectivo de diversas zonas del cuerpo humano y la glomerulonefritis aguda es una inflamación del riñón que afecta principalmente a los glomérulos renales.

MUESTRA

Suero fresco. Estable 7 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC.

REACTIVOS

• Látex -> Suspensión de partículas de látex cubiertas con SLO, pH, 8,2.

• Control + (Tapón rojo) -> Suero humano, con una concentración de ASO > 200 UI/mL.

• Control - (Tapón azul) -> Suero animal.

MATERIAL NECESARIO

• Micropipetas de 50 µL con sus puntas correspondientes.

• Porta.

PROCEDIMIENTO

Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.

Método cualitativo:

1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.

2. Depositar 50 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles + y - , sobre círculos distintos de un porta.

3. Mezclar el reactivo de ASO- látex vigorosamente antes de usar. Depositar una gota (50 µl) junto a cada una de las gotas anteriores.

4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.

5. Agitar vigorosamente el porta durante 2 min.

Método semicuantitativo:

1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L.

2. Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

CALCULOS

En este caso unicamente realizamos el método cualitativo, por lo que no sabemos la concentración.

La fórmula para su cálculo es 200* título de ASO= UI/ml

RESULTADOS

Unicamente procedimos a realizar el método cualitativo, es decir, la presencia o no de ASO.

El resultado es +.