FUNDAMENTO
Técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores reumatoides presentes en la muestra del paciente.
OBJETIVO
Determinar tanto cualitativa como cuantitativamente la concentración de factor reumatoide.
UTILIDAD CLÍNICA
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, tales como el lupus eritematoso sistémico (SLE) y el síndrome de Sjögren, su principal interés clínico radica en el diagnóstico de la artritis reumatoide (RA). Un estudio actual realizado por el “American College of Rheumatolgy” demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron positivos para el FR.
Por tanto es util para el disgnóstico y seguimiento de enfermedades reumatoides como la artritis.
MUESTRA
Suero fresco estable 7 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC.
REACTIVOS
Látex -> Suspensión de partículas de látex cubiertas con gamma-globulina humana, pH, 8,2. Azida sódica 0,95 g/L Control + Tapón rojo -> Suero humano con una concentración de FR > 30 UI/mL. Azida sódica 0,95 g/L.
Control - Tapón azul -> Suero animal. Azida sódica 0,95 g/L.
MATERIAL NECESARIO
Micropipetas de 50 µL con sus puntas correspondientes.
Porta.
PROCEDIMIENTO
Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.
Método cualitativo:
Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.
Depositar 50 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
Homogeneizar suavemente el reactivo de FR- látex antes de usar. Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores.
Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
Agitar vigorosamente el porta durante 2 minutos.
Método semicuantitativo:
Realizar diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L.
Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.
CALCULOS
La concentración aproximada de FR en la muestra del paciente viene determinada:
8* título de FR= 8*4=32 UI/ml.
RESULTADO
El valor de referencia en este laboratorio es de 8 UI/ml.
La concentración es de 32 UI/ml aproximadamente, ya que se observa aglutinación en el segundo circulo de la dilución 1/4, por tanto el título es de 4.
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