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  • graciamaria04

PRÁCTICA Nº22: CAPACIDAD DE FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO.


FUNDAMENTO:

La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnésico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada (CFTH) y el hierro sérico inicial (Hb) nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual.


OBJETIVO

Determinar la capacidad que posse el hierro para su fijación.


UTILIDAD CLÍNICA:

El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado.

El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos.

El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible.

Encontramos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica.

Niveles bajos en hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda


APARATAJE

Espectrofotómetro

Centrífuga


MATERIALES:

Tubos de ensayo

Pipetas automáticas

Puntas de pipeta

Cubetas de fotometría

Gradilla


REACTIVOS:

R 5 (Solución Saturante): Solución de hierro --> 500 µg/dL

R 6 (Agente Precipitante): Carbonato de magnesio



MUESTRA:

Suero o plasma heparinizado. Libre de hemólisis


PROCEDIMIENTO:

1. Pipetear en los tubos:

Muestra: 0,5 mL

R 5 Solución saturante: 1,0 mL

2. Mezclar bien e incubar 10 minutos a Temperatura ambiente (15 - 25ºC).

3. Añadir a cada tubo:

R 6 Agente precipitante: 3 dosis

Polvo: Medir usando la cuchara que se incluye (dosis aprox. 70 mg)

4. Mezclar bien e incubar 10 minutos a temperatura ambiente.

5. Centrifugar 15 min. a 3000 r.p.m

6. Recoger el sobrenadante, cuidadosamente y procesar como una muestra para la determinación de hierro.


CÁLCULOS Y RESULTADOS:

CFTH=concentración de hierro en sobrenadante*3

118*3=354

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