FUNDAMENTO:
Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro cálcico (CaCl2) hasta la formación del coágulo de fibrina.
OBJETIVO:
Determinar el tiempo de Tromboblastina parcial activada mediante la utilización de un coagulómetro.
UTILIDAD CLÍNICA:
La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca (Factores VIII, IX, XI, XII).
Se usa normalmente para la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
MATERIALES:
Pipetas automáticas
Puntas de pipeta
Coagulómetro
REACTIVOS:
MUESTRA:
Plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato trisódico 3,8%.
Mezclar inmediatamente la sangre con el anticoagulante. Evitar la formación de espuma.
Centrifugar la muestra a 2500 x g 15 min y transferir el plasma.
Usar solo contenedores de vidrio siliconado o plástico.
Los plasmas turbios, ictéricos, lipémicos o hemolizados pueden dar resultados erróneos.
La muestra es estable 2 horas a temperatura ambiente (15-25ºC) o 28 días si se congela inmediatamente a –20ºC.
PROCEDIMIENTO:
1. Calentar a 37ºC los reactivos y la muestra.
2. Mezclar bien los reactivos sin agitarlos.
3. Pipetear en un tubo de ensayo limpio y seco:
Plasma citratado (μL) 100
R1 (μL) 100
4. Mezclar bien e incubar exactamente 5 min. a 37ºC (tiempo de activación).
5. Pipetear:
R 2 (μL) 100
6. Mezclar
7. Poner en marcha el cronómetro o el controlador de tiempo del coagulómetro y medir el tiempo de formación del coágulo, a partir de la adición del R2 Iniciador.
RESULTADOS:
APTT control Normal = 32,6 s
APTT control Patológico = 45 s
APTT calibrador = 21,3 s
Muestra: 26s
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