PRÁCTICA Nº12: DETERMINACIÓN DEL FENONOTIPO Y GENOTIPO MÁS PROBABLE Rh

OBJETIVO/FUNDAMENTO

Investigar el genotipo más probable del sistema Rh enfrentando los hematíes problema a distintos sueros que contienen Ac dirigidos contra los Ag que componen el sistema Rh.

MUESTRA

Suspensión de hematíes de la muestra-problema y dilución al 5% en SSF

MATERIAL NECESARIO

Material para el lavado de hematíes.

Tubos para centrífuga, pipetas pasteur y papel parafilm.

Gradilla y centrífuga.

Cubreobjetos

Portaobjetos

Microscopio.

PROCEDIMIENTO:

1. Realizar el lavado de hematíes de la muestra-problema y una dilución al 5% en SSF.

2. Rotular los 6 tubos con las letras D, E, C, e, c y CD.

3. Depositar de 2 a 3 gotas del antisuero correspondiente y de 2 a 3 gotas de la suspensión de hematíes problema.

4. Tapar los tubos con papel parafilm y agitar suavemente.

5. Centrifugar a 1.000 rpm durante 1 minuto.

6. Resuspender el sedimento de hematíes dando pequeños golpecitos en el fondo del tubo.

7. Observar la presencia o ausencia de aglutinación en el visualizador, y si es necesario, en el microscopio.

RESULTADOS

Observación macroscópica de la aglutinación.

Presencia de la aglutinación (+); aparecen grumos rojos oscuros que flotan en el líquido.

Ausencia de aglutinación (-); los hematíes permanecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo.