FUNDAMENTOS/OBJETIVOS
Determinar el grupo sérico del sistema ABO.
Detectar los anticuerpos (AC) dirigidos contra los antígenos del sistema ABO presentes en el suero.
MATERIAL EMPLEADO
Tres tubos de hemólisis, tubos pequeños, gradilla y parafilm.
Portaobjetos, cubreobjetos y pipetas de Pasteur desechables.
Centrifuga.
SSF
APARATAJE
Visualizador
Microscopio.
REACTIVOS
Hematíes tipificados del grupo A, grupo B y grupo AB como control positivo.
Hematíes procedentes de la sangre-problema para control negativo (C).
MUESTRA
Suero.
PROCEDIMIENTO
Preparación de hematíes tipados A, B y AB
Seleccionar 3 muestras de sangre pertenecientes a los grupos A, B y AB.
Identificar 3 de tubos hemólisis con las letras A, B y AB.
Poner en los tubos de hemólisis 0,5 ml de sangre de cada una de las muestras A, B y AB.
Llenar hasta arriba los tubos de SF y tapar con parafilm; agitar para que se mezcle bien la sangre con el SF.
Centrifugar durante 5 min a 2500 rpm.
Extraer el sobrenadante de cada tubo con una pipeta de Pasteur especial para cada uno de ellos.
Repetir los 3 pasos anteriores 2 veces más.
Del sedimento de hematíes obtenido del último lavado y centrifugación de cada uno de los tubos A, B Y AB, coger con una micropipeta 0,1 ml y depositarlo en 3 tubos pequeños identificados con A, B y AB.
Añadir 1,9 ml de SF a cada uno de los tubos.
Taparlos con papel parafilm y guardarlos en la nevera hasta su utilización.
Determinación sérica del grupo ABO
Importante ponerse la bata y preparar el puesto de trabajo.
Identificar 4 tubos pequeños con las letras A, B, AB y C.
Añadir con una pipeta de Pasteur 3 o 4 gotas del suero problema en cada uno de ellos.
Añadir 3 o 4 gotas de los hematíes tipados anteriormente A, B y AB y de los hematíes control C en sus tubos correspondientes.
Mezclar bien mediante agitación suave.
Centrifugar a 2500 rpm durante 1 min.
Proceder a la observación de la aglutinación de los tubos en el visualizador, y si es preciso, en el microscopio.
RESULTADOS
Presencia de aglutinación (+): grumos de color rojo en un líquido claro.
Ausencia de aglutinación (-): los hematíes se resuspenden homogéneamente al golpear suavemente el fondo del tubo.
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