FUNDAMENTO/OBJETIVO
Determinar los grupos sanguíneos del sistema ABO.
Observar la presencia de aglutinación en el tubo y el microscopio.
MATERIAL
Gradilla.
Parafilm.
Tubo de hemólisis y 6 tubos pequeños.
Pipeta de Pasteur.
Micropipeta automática y puntas de plástico desechables.
APARATAJE
Centrífuga.
Visualizador.
Portaobjetos, cubreobjetos y microscopio
REACTIVOS
SF
Anti-A
Anti-B
Anti-AB (actúa como control)
MUESTRA
Sangre anticoagulada.
PROCEMIENTO
Lavado de hematíaes
Poner en un tubo de hemólisis 0,5 ml de sangre-problema.
Llenar hasta arriba de SF y tapar con parafilm, agitar para que se mezcle bien la sangre con el SF.
Centrifugar durante 5 min a 2.500 rpm (revoluciones por minuto).
Extraer el sobrenadante con una pipeta de Pasteur.
Repetir los 3 pasos anteriores 2 veces más.
Dilución de hematíes al 5%
Del sedimento de hematíes obtenido del último lavado y centrifugación , coger con una micropipeta 0.1 ml de hematíes y depositarlos en un tubo pequeño.
Añadir 1,9 ml de SF
Determinación celular de los grupos sanguíneos ABO Y Rh
Rotular 5 tubos pequeños con A, B, AB
Depositar en cada uno de ellos 3 o 4 gotas de la dilución de hematíes al 5%
Añadir 3 o 4 gotas de suero anti-A, anti-B, anti- AB en sus tubos correspondientes
Agitar cada uno de los tubos para que se mezclen bien los reactivos con los hematíes
Esperar 2 min para observar las reacciones de aglutinación resultantes.
Colocar cada uno de los tubos sobre el visualizador y observar la presencia o ausencia de aglutinación.
RESULTADOS:
Presencia de aglutinación (+): se forman grumos de color rojo en un líquido claro.
Ausencia de aglutinación (-): los hematíes se resuspenden homogéneamente al golpear el fondo del tubo.
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