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PRÁCTICA Nº22: API


FUNDAMENTO

Los sistemas comerciales manuales o galería son sistemas que consisten en unas placas con celdillas identificadas según la prueba que se desarrolle en ellas y que contienen un sustrato específico para cada prueba.

Los resultados se expresan de forma numérica, siguientes las instrucciones, y con todos ellos se obtiene un código numérico y utilizamos ese código para identificación de la bacteria.


OBJETIVO Y UTILIDAD CLÍNICA

Identificar la bacteria a tratar.


MUESTRA

Proteus


MATERIAL Y REACTIVOS

-Papel de filtro.                                                 

-Mechero Bunsen.

-Asa de siembra de platino.                           

-Pipeta Pasteur.

-Tubo de ensayo.                                               

-Tubo 0’5 de escala McFarland.

-Gradilla.                                                             

-Micropipeta.

-SSF.                                                                     

-Parafina.

-Galería ID 32 E.                                               

APARATAJE

Estufa 37º


PROCEDIMIENTO

Importante ponerse la bata y preparar el puesto de trabajo.

1.- Preparamos la mesa de trabajo con todos los materiales necesarios.

2.- Encendemos el mechero Bunsen para crear el ambiente de esterilidad.

3.- Realizamos una suspensión bacteriana de 0’5 en la escala McFarland.

4.- Para ello, colocamos en un tubo de ensayo 2 ml de SSF y con el asa de siembra de platino, esterilizada, cogemos un inóculo de la bacteria. Introducimos el asa de siembra en el tubo y lo disolvemos en él hasta alcanzar el 0’5 de turbidez de la escala McFarland.

5.- Con esta suspensión, vamos cogiendo 55 µL del tubo y vamos dispensándolo en cada celdilla de la galería ID 32 E.

6.- Rotulamos la galería con la fecha de la siembra.

7.- Para sellar la galería con las celdillas, lo tapamos con parafina. Tapamos solamente las celdas que se encuentren subrayadas.

8.- Colocamos la galería sobre un soporte con celdillas, a la que previamente se le a echado un poco de agua destilada para que a la hora de ser cultivadas, no se deshidraten. Lo tapamos con un cubregalerías.

9.- Lo ponemos a incubar en la estufa a 37 ºC y leemos los resultados a las 24 horas.

10.- Pasado este tiempo, leemos la siembra. Para ello, debemos depositar una gota de reactivo de Kovac.

11.- Para la lectura de resultados nos guiamos por el cambio de color producido en cada celdilla y apuntamos los resultados en una plantilla.


LECTURA E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS


Se trata de proteus.


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