FUNDAMENTO
Para poder estudiar el crecimiento bacteriano y obtener poblaciones de las bacterias de interés, es necesario cultivarlas. En esta ocasión vamos a cultivarlas en un medio sólido en placa de petri. Utilizaremos un medio de cultivo general, como el agar nutritivo.
En esta práctica también usaremos una placa de Manitol Salado (Mac Conkey) para la siembra de S. aureus.
OBJETIVO
El objetivo de esta práctica no es simplemente hacer que la colonia crezca, sino que lo que queremos es aislarla. Para ello utilizaremos un método, el de siembra por agotamiento de estrías, que se tarda más en decir el nombre que en realizar la práctica .
UTILIDAD CLÍNICA
La siembra es útil clinicamente, ya que se usa para el diagnostico de diversas enfermedades, mayoritariamente infecciosas, y el seguimiento de las mismas.
APARATAJE
Estufa 37ºC
MUESTRA
Exudado orofaríngeo.
S. aureus
MATERIAL NECESARIO
Placa de Petri de Agar sangre.
Placa de Petri de manitol salado.
Asa de siembra de platino con mango de plástico.
Mechero bunsen.
Hisopo sin medio de transporte.
PROCEDIMIENTO:
Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.
Anterior a la siembra, se debe rotular la base de la placa con el nombre del microorganismo, nombre del técnico y fecha.
IMPORTANTE: realizar todo el procedimiento y mantener el material en las inmediaciones de la llama para evitar la contaminación del medio de cultivo.
Siembra de S. aureus en Manitol salado:
Flambear al asa de siembra, dejar enfriear en el extremo de la placa de petri ligeramente abierta, a continuación coger un poco de microorganismo en una zona que este aislado. *Se debe de coger poco para no que no haya exceso*.
Pasamos la muestra a nuestra placa de petri y realizamos la técnica citada anteriormente.
Se deposita la muestra y se realizan unas cuantas estrías en zig-zag, moviéndola de un lado hacia otro, hasta llegar casi a la mitad de la placa.
Giramos la placa 90º y realizamos la misma operación. De esta manera obtendremos microorganismos en los lados y en el lado superior.
Una vez realizada la siembrea, se volverá a flambear el asa de siembra para esterilizarlo.
Lo introducimos en la estufa y esperamos 24-48 horas para la visulaización del reusltado.
Siembra de microorganismos de un exudado orofaríngeo:
Obtenemos el exudado orofaríngeo: con un hisopo recogemos una muestra de exudado orofaríngeo.
Con el mismo hisopo sembramos por estrías en un medio de cultivo nutritivo como el agar sangre.
Lo introducimos en la estufa y esperamos 24-48 horas para la visulaización del reusltado.
RESULTADO Y OBSERVACIONES
En esta placa podemos observar como ha crecido el S. aureus, en algunos puntos está aislado.
En la siguiente imagen podemos observar microorganismos del exudado orofaríngeo sin patogenicidad.
*Error común: antes de realizar la siembra, el asa debe de estar frío, ya que se puede quemar el microorganismo y no crecer.*
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