PRÁCTICA Nº10: SIEMBRA EN MEDIO DE CULTIVO SÓLIDO INCLINADO EN TUBO.

FUNDAMENTO

Este tipo de siembra se utiliza para el crecimiento de microorganismos en aerobiosis. La preparación del medio inclinado permite que exista una mayor superficie sobre la que sembrar en un espacio relativamente pequeño, por lo que el riesgo de contaminación es menor.

OBJETIVO

El objetivo de esta práctica no es mas si no el crecimiento y aislamiento de micrrorganismos en anaerobiosis.

APARATAJE

Estufa 37ºC

MUESTRA

• S. aureus

• E. coli

MATERIAL NECESARIO

• Tubos con medio de cultivo sólido inclinado.

• Mechero Bunsen

• Asa de siembra con mango de pástico.

• Gradilla.

PROCEDIMIENTO

Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.

Anterior a la siembra, se debe rotular el tubo con el nombre del microorganismo, nombre del técnico y fecha.

IMPORTANTE: realizar todo el procedimiento y mantener el material en las inmediaciones de la llama para evitar la contaminación del medio de cultivo.

1. Colocar los tubos que se vayan a sembrar en una gradilla y rotularlos.

2. Esterilzar el asa de siembra acercándola a la llama del mechero hasta la incandescencia del filamento. Esperar que se enfrie en la boca del tubo.

3. Sostener con la mano no dominante el tubo en la que se encuentra la muestra de bacteria que se va a sembrar. Quitar el tapón con el dedo meñique de la mano dominante, manteniendolo en todo momento cerca de la llama.

4. Flamear ligeramente la boca del tubo.

5. Introducir el asa y coger el inóculo.

6. Sacar el asa de siembra del tubo evitando tocar las paredes del mismo.

7. Flamear la boca del tubo, cerrarlo y colocarlo en la gradilla.

8. Proceder a la siembra por estrías, es decir, en zig-zag en el tubo.

9. Esterilizar el asa de siembra con el mechero.

10. Incubar los tubos en la estufa a 37ºC durante 24 horas.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES

Tras la incubación se observa el crecimiento de colonias, y aislamiento de las mismas.

*ERRORES: uno de los errores comunes, por lo que no se produce el crecimiento de los microorganismos se produce cuando esterilizamos el asa de siembra. Este puede que no este suficientemente frío y queme los microorgmanismos.*