FUNDAMENTO
En esta serie de prácticas vamos a realizar las pruebas para la determinación de los cocos Gram –. Gracias a estas pruebas podremos determinar la especie bacteriana de una muestra problema. En nuestro caso, al ser unas prácticas de laboratorio, vamos a realizar las pruebas con distintas bacterias para observar como sería una prueba positiva y/o negativa.
En este caso estudiaremos la ONPG en la que determinamos la capacidad que presentan algunas bacterias, que poseen el enzima β- galactosidasa, para fermentar la lactosa originando glucosa y galactosa.
OBJETIVOS
Identificar cocos Gram - lactosa + con glucosa y galactosa +.
UTILIDAD CLÍNICA
Esta técnica es útil para identificar microorganismos que causen una enfermedad para su posterior disgnóstico y estudio.
APARATAJE
Estufa de 37ªC
MUESTRA
Coco Gram - ONPG +
REACTIVOS
Discos de ONPG
MATERIAL NECESARIO
Asa de siembra de paltino con mango de plástico.
Tubo de ensayo.
Gradilla
Pipetas
Pinzas.
SSF
PROCEDIMIENTO
Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes.
Anterior a la siembra, se debe rotularla base de la placa con el nombre del microorganismo, nombre del técnico y fecha.
IMPORTANTE: realizar todo el procedimiento y mantener el material en las inmediaciones de la llama para evitar la contaminación.
Con unas pinzas estériles, se deposita un disco de ONPG en un tubo de ensayo que contiene 1 ml de solución salina estéril.
Con el asa de platino, se inocula una colonia.
Incubar 24h a 37ºC
RESULTADO Y OBSERVACIONES
Si observamos, después de la incunbación, que el líquido es amarillo, nos encontramos ante la presencia de B-galactosidasa; si el medio es transparente carece de la misma.
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