FUNDAMENTO
El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé.
La creatinina reacciona con e picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las de las interferencias conocidas del método.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.
UTILIDAD CLÍNICA
La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.
La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables.
Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico
Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal.
El diagnóstico clínico dbe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
OBJETIVO
Determinación cuantitativa de creatinina.
REACTIVOS
R1: Reactivo pícrico -> Ácido pícrico.
R2: Reactivo alcalinizante -> Hidróxido sódico.
CREATINNINE CAL: Patrón primario acuoso de Creatinica.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Reactivo de trabajo: mezclar volúmenes iguales de R1 Reactivo
Pícrico y de R2 Reactivo Alcalinizante
Estabilidad del reactivo de trabajo: 15 días a 2-8ºC o 7 días a temperatura ambiente (15-25ºC)
APARATAJE
Espectofotómetro de absorción Thermo electron
MATERIAL EMPLEADO
Cubetas.
Pipetas automáticas con sus puntas correspondientes.
MUESTRAS
Suero o plasma heparinizado
Estabilidad de la creatinina: 24 horas a 2-8ºC
Orina: diluir la muestra al 1/50 con agua destilada. Mezclar. Multiplicar el resultado obtenido por 50( facotro de dilución)
Estabilidad de la creatinina: 7 días a 2-8ºC.
PROCEDIMIENTO
Antes de empezar la realización de la práctica, el puesto de trabajo debe de estar adecuadamente preparado con los materiales necesarios y sin olvidar la bata y guantes
1. Condiciones del ensayo:
Losngitud de onda: 492 nm
Cubeta: 1 cm paso de luz
Temperatura: 37ºC/15-25ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta:
4. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
5. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos (A2) de la adición de la muestra.
Calcula: AA= A2 - A1
RESULTADO Y CALCULOS
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